Qualitätskontrolle für eukaryotische und prokaryotische Zellbanken

3 weeks ago


Dublin, Dublin City, Ireland Tentamus 2022 Full time
Reinheitsprüfung von Bakterienzellbanken (prokaryotischen Zellbanken)

- Identitäts‑, Reinheits- und Qualitätsprüfungen an mikrobiellen Zellbanken, lebenden biotherapeutischen Produkten und therapeutischen Bakteriophagen-Präparaten

- Nachweis und Identifizierung von mikrobiellen Verunreinigungen

- Bakteriophagen-Präsenztest zur Überwachung und Kontrolle von Bakteriophagen-Kontaminationen in der Bioproduktion

- Charakterisierung von Bakterienstämmen (Produktionsstämmen)

- Genotypisierung/Phänotypisierung (z. B. RFLP, RADP-Fingerprinting, Phagen Typisierung, biochemische Identifizierung durch API 20E, Identifizierung durch 16S rDNA oder ITS-Sequenzierung)

- Plasmid-Retention (Plasmid-Stabilität)

- Überprüfung der Konsistenz der kodierenden Sequenz der Expressions-Konstrukte (Plasmide mittels PCR und Sequenzierung)

Test auf Bakteriophagen in bakteriellen Zellbanken und Fermentationsproben (validiert für E. coli)

- Nachweis von virulenten Bakteriophagen (lytischer Replikationszyklus)

- Nachweis von temperenten Bakteriophagen (lysogener Replikationszyklus)

- Nachweis von Prophagen

- Tests zur Identifizierung von Phagen und zum Nachweis von Bakteriophagen für andere Spezies als E. coli können auf Anfrage entwickelt und validiert werden

Herstellung und Sicherheitsprüfung von eukaryontischen Zellbanken

- Herstellung von eukaryotischen Master- und Working Zellbanken

- GMP konforme Expansion der Expressionslinie

- Herstellung der Master- und Working Zellbank (100 Vials)

- Zell-Identitätsprüfung mittels DNA Fingerprinting

- Kryokonservierung in flüssigem Stickstoff

- GMP konforme Sicherheitsprüfung der Expressionslinie

- Sterilität, Mykoplasmen, Zellviabilität, Verdopplungsrate, Expressionsstärke

- Nachweis viraler Kontamination im Zellkulturmodell MCB / WCB (Adventitious Agents in vitro nach Ph. Eur. 2.6.16 / 5.2.3)

- Testung über 14 und 28 Tage

- Nachweis von sehr niedrigen viralen Kontaminationen in biologischen Produktionen

- Kombination der Produktionszelllinie (oder verwandter Zelllinien) mit guideline-konformen Indikatorzelllinien

- Auswählbare virale Standards für relevante Arten

- Nachweis von tierischen Erregern (9CFR Testung)

- Bestimmungsnachweis: Zytopatscher Effekt (CPE), Hämadsorption (HAD), Hämagglutination (HA)

- Auswahl von weiteren Viren nach Absprache

- Nachweis von Retroviren

- qPCR-Methode: Product enhanced reverse Transcriptase (F-PERT)

- in vitro-Methode: S+ L- Assay

- Nachweis der infektiösen Kapazität viraler Vakzinen

- Testung der Produktionslinien

- Nachweis mittels Durchflusszytometrie

- Bestimmung des TCID 50

- Bestimmung der Expression des genetischen Inserts

- Nachweis Replikations-kompetenter Viren

- Guideline konforme Grenzwert-Testung (z.B. > 1 ifu unter 3 × 10E10 virale Partikel für Adenoviren RCA)

- Bestimmungsnachweis: Zytophatischer Effekt, Immuncytochemie, qPCR

#J-18808-Ljbffr

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